Diagnóza akromegalie je poměrně snadná (ale jen když o tom přemýšlíte), protože zahrnuje krevní test ke stanovení hladiny GH a IGF-1. V akromegalii je vysoká hladina IGF-1 a GH s vědomím, že sekrece GH je normálně přerušovaná, ale že v akromegalii je vždy vysoká, protože již není regulována. Definitivní laboratorní diagnóza je založena na glukózovém testu. Vzhledem k tomu, že glukóza normálně snižuje sekreci růstového hormonu, perorální podávání glukózy umožňuje pomocí postupných krevních testů zjistit, že při akromegalii zůstává sekrece růstového hormonu vysoká.

Jakmile je hypersekrece GH potvrzena, je pak nutné najít jeho původ. Dnes je zlatým standardem MRI mozku, která může ukázat nádor hypofýzy. Ve velmi vzácných případech jde o nádor umístěný jinde (nejčastěji v mozku, plicích nebo slinivce), který vylučuje další hormon působící na hypofýzu GHRH, který stimuluje tvorbu GH. Poté se provede rozsáhlejší hodnocení, aby se zjistil původ této abnormální sekrece.