Technika propojeného enzymového imunoabsorpčního testu – anglicky Enzyme-Linked Immuno Assay – neboli ELISA test je imunologický test, který umožňuje detekci nebo stanovení molekul v biologickém vzorku. Konceptualizovali jej a vyvinuli dva švédští vědci, Peter Perlmann a Eva Engvall ze Stockholmské univerzity v roce 1971.

Molekuly testované metodou ELISA jsou obecně proteiny. Mezi typy vzorků patří tekuté biologické materiály – plazma, sérum, moč, perspirant –, kultivační média pro buňky nebo rekombinantní protein – protein produkovaný buňkou, jejíž genetický materiál byl změněn genetickou rekombinací – purifikovaný do roztoku.

Test ELISA se používá hlavně v imunologii k detekci a/nebo měření přítomnosti proteinů, protilátek nebo antigenů ve vzorku. Tento sérologický test detekuje zejména protilátky produkované tělem v reakci na virovou kontaminaci.

Využití protilátek pro diagnostiku infekčních onemocnění představuje specifickou a rychlou metodu. Technika ELISA je imunoenzymatická technika, která umožňuje z biologického vzorku vizualizovat reakce mezi antigenem – tělesem považovaným živým organismem za cizí – a protilátkou pomocí barevné reakce produkované enzymovým markerem – obecně alkalická fosfatáza a peroxidáza – dříve připojené k protilátce. Barevná reakce potvrzuje identifikaci izolované bakterie nebo přítomnost požadovaného viru a intenzita zbarvení dává údaj o množství antigenů nebo protilátek v daném vzorku.

Existují čtyři hlavní typy testu ELISA:

• ELISA přímo, umožňuje detekovat nebo měřit protilátky. Používá pouze primární protilátku;
• ELISA nepřímá, nejpoužívanější, také umožňuje detekovat nebo testovat protilátky. Používá sekundární protilátku, která mu poskytuje lepší citlivost než přímá ELISA;
• ELISA v soutěži, umožňuje dávkování antigenů. Vyrábí se soutěží o vazby, nepoužívá enzym;
• ELISA "v sendviči", umožňuje dávkování antigenů. Tato technika se běžně používá ve výzkumu.

Test ELISA se používá pro:

• Najděte a změřte protilátky v sérologii pro diagnostiku infekčních onemocnění: virologie, parazitologie, bakteriologie atd.;
• Dávkování proteinů v nízkých koncentracích: specifické dávky určitých plazmatických proteinů (imunoglobulin E (IgE), feritin, proteinové hormony atd.), nádorové markery atd.;
• Dávkujte malé molekuly: steroidní hormony, hormony štítné žlázy, léky…

Test ELISA se používá zejména k diagnostice mnoha infekčních onemocnění:

Pohlavně přenosné choroby (STD)

Včetně hepatitidy, syfilis, chlamydií a HIV. Doporučený zdravotnickými úřady je hlavním screeningovým testem AIDS: šest týdnů po infekci ukazuje přítomnost anti-HIV protilátek a antigenu p24.

Regionální nebo endemické choroby

Žlutá zimnice, virová choroba Marburg (MVM), Ladengue, Lymeská choroba, Chikungunya, horečka Rift Valley, Ebola, horečka Lassa atd.

Covid-19

Test ELISA, který má být proveden více než 2 až 3 týdny po nástupu příznaků, umožňuje za méně než hodinu identifikovat přítomnost protilátek anti-SARS-CoV-2.

Virové patogeny, které způsobují prenatální infekce

Například toxoplazmóza, zarděnky, cytomegalovirus, herpes simplex.

Jiné případy

Ale také našel uplatnění v detekci:

• Těhotenství;
• Autoimunitní onemocnění;
• Potravinové alergeny: kvantitativní stanovení celkových imunoglobulinů E (IgE) pomáhá při hodnocení a léčbě alergií;
• Hormonální poruchy;
• Nádorové markery;
• Rostlinné viry;
• A mnoho dalších

V rámci detekce protilátek proti SARS-CoV-2 pilotní studie provedená v srpnu 2020 Institut Pasteur, CNRS, Inserm a Pařížskou univerzitou potvrzuje spolehlivost testu ELISA: oba testované testy ELISA používají celý N protein SARS-CoV-2 (ELISA N) nebo extracelulární doména virové špičky (S) jako cílové antigeny. Tato technika by umožnila identifikovat protilátky ve více než 90 % případů s velmi nízkou mírou falešně pozitivních 1 %.

Testy Elisa, které se provádějí v analytických laboratořích na lékařský předpis, stojí kolem 10 eur a jsou ve výši 100 % hrazeny zdravotní pojišťovnou.

Provádějí se v bezplatných informačních, screeningových a diagnostických centrech (CeGIDD) a mohou být zdarma pro HIV a SARS-CoV-2.